Metod för att upptäcka homolog blodtransfusion

Metod för att fastställa homolog blodtransfusion

Två dopningsfall med homolog blodtransfusion (HBT) under sommar-OS i Tokyo 2020 visar att fler kontroller behövs. Metoden för detektion med användning av flödescytometri för att utvärdera uttrycket av mindre blodgruppsantigener från röda blodkroppar (RBC) och identifiera olika RBC-populationer är effektiv men fortfarande komplex att utföra med detektion av flera antigener.

Nyligen har intresset för att använda kriminalteknisk DNA-analys också framhållits som en potentiell ny metod för att detektera HBT, med möjlighet att börja från torkade blodfläckar (DBS) istället för färskt blod. Efter en första utvecklingsfas validerades ett protokoll för att detektera HBT med DNA-analys efter extraktion från DBS. Närvaron av en andra DNA var tydlig ner till 2 procent av donerat blod in vitro. Ett flödescytometriprotokoll utvecklades också med förberedelse och analys i 96-brunnars plattor och detektion av två olika antigener per brunn med hjälp av två sekundära antikroppar med olika fluoroforer. Målet med projektet var att utvärdera detektionsfönstret för en HBT utförd in vivo med 150 ml RBC-koncentrat. Blodprover som erhölls över 7 veckor efter transfusionen analyserades.

DNA-profilering från DBS var inte tillräckligt känslig för att detektera närvaron av en andra DNA även 1 dag efter transfusion. Å andra sidan var flödescytometriprotokollet mycket effektivt och möjliggjorde identifiering av flera dubbla populationer av RBC (som uttrycker/icke-uttrycker flera antigener) fram till dag 50 efter transfusionen. Detta protokoll kan fullständigt valideras för en framtida tillämpning på dopingkontrollprover

Referens: Marchand A, Roulland I, Semence F, Jaffredo F, Dehainault C, Le Guiner S, Le Pajolec MG, Donati F, Mekacher LR, Lamek K, Ericsson M. Evaluation of the detection of the homologous transfusion of a red blood cell concentrate in vivo for antidoping. Drug Test Anal 2023; 15: 1417-29.