Påvisande av clenbuterol i griskött

För att etablera och validera en enkel och pålitlig analytisk metod för separation och bestämning av clenbuterol-enantiomerer (R-(-)-clenbuterol och S-(+)-clenbuterol) i animaliska vävnader och tillämpa den på den enantioselektiva distributionen av clenbuterol hos mini-grisar.

En LC-MS/MS-analytisk metod utvecklades och validerades i positivt flera reaktions-övervakningsläge med elektrosprayjonisering. Efter avproteinisering med perklorvätesyra förbehandlades proverna endast genom en stegvis vätske-vätskeextraktion med tert-butylmetyl etrar under stark alkaliskt tillstånd. Teikoplanin användes som kiralt selektor och en 10 mM ammoniumformatmetanollösning användes som mobil fas. De optimerade kromatografiska separationsförhållandena slutfördes på 8 minuter. Två kirala isomerer i 11 ätbara vävnader från Bama mini-grisar undersöktes.

R-(-)-clenbuterol och S-(+)-clenbuterol kunde baslinjesepareras och noggrant analyseras med ett linjärt intervall på 5-500 ng/g. Noggrannheterna var mellan -11,9 och 13,0 procent för R-(-)-clenbuterol och -10,2 och 13,2 procent för S-(+)-clenbuterol, intra-dag och inter-dag precisionsintervall var mellan 0,7 och 6,1 procent för R-(-)-clenbuterol och 1,6-5,9 procent för S-(+)-clenbuterol. R/S-förhållandena i ätbara vävnader hos grisar var alla signifikant lägre än 1.

Den analytiska metoden har god specificitet och robusthet vid bestämning av R-(-)-clenbuterol och S-(+)-clenbuterol i animaliska vävnader och kan användas som en rutinmässig analysmetod för livsmedelssäkerhet och dopingkontroll. Det finns en betydande skillnad i R/S-förhållandet mellan vävnader från grisfödning och farmaceutiska preparat (racemat med R/S-förhållande på 1), vilket gör det möjligt att identifiera källan till clenbuterol vid dopingkontroll och undersökning.

Referens: Zhang J, Lu J, Zhang Y, Wang Y. A LC-MS/MS method for determination of clenbuterol enantiomers in animal tissues and its application to the enantioselective distribution in Bama mini-pigs. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2023; 1226: 123790.